Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
8.1. Визуальная оценка. Визуальную оценку используют как для не инструментальных, так и для инструментальных методов.
Предел количественного определения устанавливают путем анализа образцов с известными концентрациями анализируемого вещества и оценкой минимального содержания, при котором анализируемое вещество определяется количественно с требуемой правильностью и точностью.
8.2. Соотношение Сигнал/Шум. Этот подход применим только к тем методам, для которых наблюдается шум базовой линии (см. 7.2.). Для определения соотно-
шения сигнал/шум сравнивают величины сигналов, полученные для холостого опыта и для образцов с низкими концентрациями анализируемого вещества. На основании полученных данных устанавливают минимальную концентрацию, для которой величина отношения сигнал/шум составляет около 10:1.
8.3. Использование калибровочной прямой и стандартного отклонения сигнала
МВ = 10 х - (2)
S
где:
5 - стандартное отклонение сигнала,
S - тангенс угла наклона калибровочной прямой.
Значение тангенса угла наклона калибровочной прямой может быть определено из калибровочной прямой для анализируемого вещества. Оценка стандартного отклонения сигнала может быть проведена многими способами, например, следующими.
8.3.1. Использование стандартного отклонения сигнала для контрольного опыта. Измеряют величину аналитического сигнала для необходимого числа образцов, не содержащих анализируемое вещество, и вычисляют стандартное отклонение.
8.3.2. Использования калибровочной прямой. Получают калибровочную прямую для образцов с содержанием анализируемого вещества, близким к пределу обнаружения, и вычисляют ее параметры. В качестве стандартного отклонения б в формуле (2) может быть использовано стандартное отклонение свободного члена линейной зависимости.
8.4. Представление данных. Представляют значение предела обнаружения с указанием способа, использованного для его определения. Значение предела определения должно быть подтверждено анализом необходимого числа образцов с содержанием анализируемого вещества, близким к пределу обнаружения.
9. Робастность
Оценку робастности проводят на стадии разработки методики с учетом типа изучаемой методики. Эта оценка должна доказать надежность результатов анализа при небольших изменениях параметров методики.
Если на результаты анализа влияют условия его проведения, то эти условия должны быть стандартизированы, и в текст методики вносят соответствующие предостережения.
Типичные примеры изучаемых параметров:
— устойчивость во времени аналитических растворов;
— время экстракции.
В случае жидкостной хроматографии:
— рН подвижной фазы;
— состав подвижной фазы;
— колонки (различные серии и/или поставщики);
— температура;
— скорость подвижной фазы.
В случае газовой хроматографии:
— колонки (различные серии и/или поставщики);
— температура;
— скорость газа-носителя.
10. Проверка пригодности хроматографической системы
Проверка пригодности системы является составной частью многих аналитических методик. Этот тест основан на представлении о том, что оборудование, электроника, аналитические операции и анализируемые образцы составляют единую систему, которую можно исследовать как целое. Параметры, вводимые в тест «Проверка пригодности хроматографической системы», зависят от используемого метода анализа и обосновываются исследованиями по робастности.
С. ВАЛИДАЦИЯ АНАЛИТИЧЕСКИХ МЕТОДИК - ОСОБЕННОСТИ ЕЕ ПРИМЕНЕНИЯ К МЕТОДАМ, ИСПОЛЬЗУЕМЫМ В ФАРМАКОПЕЕ
1. Оптическое вращение (2.2.7)
1.1. Введение. Выбирают растворитель, позволяющий получать максимально возможный угол вращения. Исследуют стабильность угла вращения испытуемого раствора в течение не менее 2 ч. При необходимости указывают, что раствор используют свежеприготовленным. В необходимых случаях указывают время достижения стабильного значения угла вращения.
Там, где возможно, используют D-линию натрия.
1.2. Идентификация. Если испытуемое вещество представляет собой энан-тиомер, то для идентификации используют удельный показатель оптического вращения.
Если удельный показатель оптического вращения используют только для целей идентификации, то его значение можно не пересчитывать на сухое вещество. Регламентируемые пределы величины удельного показателя должны учитывать допустимые пределы количественного содержания анализируемого вещества и чистоту образцов различного происхождения, которые выдерживают требования соответствующей монографии.
Если удельный показатель оптического вращения используется также и для контроля чистоты энантиомеров, то испытание раздела «Идентификация» может содержать ссылку: выдерживает требования испытания «Удельное оптическое вращение».
1.3. Испытания. Удельный показатель оптического вращения (в отдельных случаях угол вращения) может быть использован для подтверждения оптической чистоты энантиомера. Этот метод менее чувствителен, чем метод жидкостной хроматографии (ЖХ). В случае, когда измерение удельного оптического вращения предназначено для того, чтобы нормировать содержание одного из энантиомеров, необходимо показать, что в условиях методики анализируемый энантио-мер имеет достаточную величину оптического вращения, чтобы быть обнаруженным. Результат определения представляют в пересчете на сухое вещество. Там, где это возможно, представляют данные о влиянии потенциальных примесей. Пределы удельного показателя оптического вращения устанавливают с учетом возможного содержания примесей. При отсутствии информации об оптическом вращении примесей обычно устанавливают пределы отклонения ±5 % от среднего значения, полученного на образцах, отвечающих всем остальным требованиям частной ста-
